關(guān)于PCR儀您了解多少？

　　PCR儀已成為一種潮流。反應時(shí)間從90分鐘縮短到30分鐘，是受歡迎的，畢竟誰(shuí)也不想在預約時(shí)排隊等太久。溫度循環(huán)是所有PCR的基礎。變溫速率將決定PCR運行的整體速度。毫無(wú)疑問(wèn)，變溫越快，PCR運行也越快。宣傳資料往往也會(huì )首先展示zui高變溫速率以暗示運行速度更快。因此，在拿到參數表時(shí)，我們先會(huì )留意變溫速率，也就是升降溫速率。當然，樣品的變溫速率可沒(méi)有模塊那么高。這就好比在爐子上燒水，爐子很快就達到100℃以上，但水可能只有50℃。模塊的熱量傳遞到樣品還需要一定的滯后時(shí)間。因此，只根據模塊溫度編程而不考慮樣品體積的變溫速率并不能算準確。這個(gè)參數能反應儀器根據體積來(lái)控制樣品達到設置溫度、遵循預設的實(shí)驗方案運行的真實(shí)能力，更有效地評估真實(shí)性能。

　　PCR儀通常由熱蓋部件、熱循環(huán)部件、傳動(dòng)部件、控制部件和電源部件等部分組成。在普通PCR儀設計基礎上增加熒光信號激發(fā)和采集系統和計算機分析處理系統，形成了具有熒光定量PCR功能的儀器。其PCR擴增原理和普通PCR擴增原理相同，在PCR擴增時(shí)加入的引物是利用同位素、熒光素等進(jìn)行標記，使用引物和熒光探針同時(shí)與模板特異性結合擴增。擴增的結果通過(guò)熒光信號采集系統實(shí)時(shí)采集信號連接輸送到計算機分析處理系統，得出量化的實(shí)時(shí)結果輸出。

　　有單通道，雙通道和多通道之分。當只用一種熒光探針標記的時(shí)候，選用單通道；有多種熒光標記的時(shí)候使用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標記和目的基因表達產(chǎn)物，因為一次只能檢測一種目的基因的擴增量，需多次擴增才能檢測完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR，實(shí)現一次檢測多種目的基因的功能。